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过表达慢病毒载体包装试验

过表达慢病毒载体包装试验

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产品名称: 过表达慢病毒载体包装试验

英文名称: 过表达慢病毒载体包装试验

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北京碧橙蓝生物科技有限责任公司
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特点:
·技术平台:慢病毒表达系统
·逆转录病毒的一种,转染效率高,可以整合到受感染细胞的基因组,从而长期稳定表达外源目的蛋白
·可用于难转染的细胞系如原代细胞、干细胞、悬浮细胞和处于非分裂状态的细胞
 
原理:
  慢病毒可通过顺式作用元件将携带的基因运送到细胞核,并将要表达的基因序列整合到细胞基因组中,因此,采用慢病毒可以得到持续稳定的高表达。我公司采用慢病毒系统进行高滴度的复制缺陷型慢病毒颗粒的生产,可以有效转导几乎所有分裂和非分裂类型的细胞。
 
应用:
基因转染:用于较难转染的细胞如神经元细胞、干细胞或其它原代细胞,快速建立生产或沉默目的蛋白的细胞系

药物研究:构建表达受体蛋白的细胞系,研究药物的作用

基因治疗、转基因动物的制备等


服务流程:
 

  1. 构建和纯化含有外源目的基因的慢病毒表达载体
  2. 慢病毒表达载体与pGag/Pol、pRev、pVSV-G质粒共转染293T细胞
  3. 收集上清制备病毒粗提液
  4. 病毒纯化、浓缩(可选)
  5. 测定病毒滴度
  6. 将病毒液加入靶细胞
  7. 分析重组目的蛋白的表达情况(可选)
 
客户提供:
·含有目标基因的质粒(提供测序图谱)或所要表达的目的基因的名称与序列
·所需要的病毒滴度及总量,病毒是否需要纯化
·宿主细胞
·若需要检测外源基因的表达,如需要请提供相应的抗体
 
我们提供:
 

携带有外源目的的基因片段的细胞株

已测定好滴度、可以直接进行后续分析的慢病毒储存液(一般为10ml滴度为105-106的病毒原液)